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魚肉中妥布霉素的測定——SPE-UPLC-MS/MS法解決方案
  • 更新日期:2018-02-12     信息來源:本站      瀏覽次數(shù):3270
    • 魚肉中妥布霉素的測定——SPE-UPLC-MS/MS法解決方案

      參考標準《GB/T 21323-2007 動物組織中氨基糖苷類藥物殘留量的測定 液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法》

          目前有關(guān)妥布霉素檢測的文獻和標準較少,主要參考標準《GB/T 21323-2007 動物組織中氨基糖苷類藥物殘留量的測定 液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法》;液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)具有高靈敏度和高特異性,適用于基質(zhì)復(fù)雜、樣品組分含量很低的獸藥殘留的確證分析。

       

      方法優(yōu)勢

          迪馬科技開發(fā)的《魚肉中妥布霉素的檢測》:

      1. 采用三氯乙酸水提取、ProElut PXC固相萃取柱凈化和超液相色譜-質(zhì)譜法檢測;
      2. 具有前處理步驟簡單、回收率高、方法穩(wěn)定性好、凈化效果優(yōu)異等特點;
      3. 使用氰基液相色譜柱進行分析,峰形和保留時間均符合要求;
      4. 過柱方法簡單易操作,對操作人員要求不高,檢測成本相對較低;
      5. 定量限是20 μg/kg,與國標方法一致。

      魚肉中妥布霉素的測定——SPE-UPLC-MS/MS

      1、適用范圍

      本方案適用于魚肉中妥布霉素檢測。本方法定量限是20.0 μg/kg。

       

      2、 標準品配制

      (1)     單標儲備液1000 μg/mL,準確稱取妥布霉素,用水配制成1000 μg/mL的儲備液。

      (2)     中間液10.0 μg/mL,吸取適量單標儲備液1000 μg/mL,用水配制成10 μg/mL的中間液。

       

      3、提取

      (1)     稱取樣品(魚肉)5.0 g(至0.05 g),置于50mL離心管中。加入20 mL三氯乙酸水(25 g/L)和2 mL二氯甲烷,渦旋分散,振蕩5 min,8000 r/min離心2min,收集上清液;

      (2)     在上清液中加入5 mL乙腈混勻,8000 r/min離心2 min,待凈化(離心為了去除乙腈水溶解時產(chǎn)生的氣泡)。

       

      4、凈化—— ProElut PXC 60 mg/3 mLCat.# 68203

      (1)活化:

      依次加入3 mL甲醇,3 mL水,流出液棄去;

      (2)上樣:

      將上樣液加入柱中,流出液棄去;

      (3)淋洗:

      (4)洗脫:

      依次用5 mL水、3 mL甲醇淋洗,流出液棄去;

      3 mL 20%氨水甲醇洗脫,收集洗脫液;

      (5)定容:

      將洗脫液在40 ℃水浴下通入氮氣吹至0.2 mL,然后用流動相重新定容至0.5 mL,上機分析。

      同方法制備基質(zhì)匹配標準溶液。

       

      5、色譜條件

      UPLC 條件:

      色譜柱:Platisil CN150 x 4.6 mm,5 μm (Cat.# 99506)

        速:0.5 mL/min   

      進樣量:5 μL  

        溫:35

      流動相: A3%甲酸水    B3%甲酸乙腈    AB=9:1

       

      質(zhì)譜條件:

      電離模式:ESI           

      掃描方式:正離子掃描

      檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)測

      電噴霧電壓:5500 V

      霧化氣壓力:60 psi      

      輔助氣壓力:60 psi

      氣簾氣壓力:20 psi      

      離子源溫度:550

      定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

      藥物名稱

      定性離子對

      m/z

      (母離子/子離子)

      定量離子對

      m/z

      (母離子/子離子)

      碰撞氣能量/eV

      去簇電壓/V

      妥布霉素

      468.2/163.1

      468.4/163.2

      35

      70

      468.4/144.8

      25

      468.4/205.3

      30

      468.2/324.1

      20

       

      6、添加回收結(jié)果

      文本框: 添加水平魚肉中妥布霉素檢測的添加回收結(jié)果(%)

      文本框: 目標物文本框: 基 質(zhì)               

      回收率(%

      添加濃度為20 μg/kg,加標量:10 μg/mL,加10 μL

      龍利魚

      鯽魚

      鰻魚

      妥布霉素

      89.2

      95.3

      93.7

                                                                                                              

       

       

       

       

       

      RT 3.03 min 妥布霉素

       

      妥布霉素標準品0.2 μg/mLMRM色譜圖

       

      魚肉中妥布霉素的測定——SPE-UPLC-MS/MS法相關(guān)產(chǎn)品信息

      貨號

      名稱

      規(guī)格

      樣品前處理

      68203

      ProElut PXC

      60 mg/3 mL 50/pk

      244358

      12管防交叉污染真空SPE萃取裝置

      12

      4803

      1,3,6 mL柱管通用連接器

      15/pk

      4806

      考克(控制流量)

      15/pk

      99011

      真空/正壓兩用泵,無油

      1/pk

      99013

      抽濾瓶套裝

      (包括硅橡膠管2, 2 L抽濾瓶及橡膠塞)

      1/pk

      30039

      FitMax針頭式過濾器 Nylon

      13 mm, 0.22 μm 100/pk

      30040

      FitMax針頭式過濾器 Nylon

      13 mm, 0.45 μm 100/pk

      色譜柱及保護柱

      99506

      Platisil CN色譜柱

      150×4.6 mm5 μm 

      HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑

      50102

      甲醇 HPLC

      4 L

      50101

      乙腈 HPLC

      4 L

      50117

      二氯甲烷 HPLC

      4 L

      50144

      甲酸 HPLC

      50 mL

      通用色譜產(chǎn)品

      52401B

      瓶架/藍色

      50

      52401A

      瓶架/白色

      50

      1034

      樣品瓶(棕色/螺紋)

      2 mL, 100/pk

      1035

      樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝)

      100/pk

      H80465

      HPLC 進樣針

      25 μL

      紅色產(chǎn)品貨號#30039、#30040、#1034#1035*

    北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

    北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

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