其一，在c8反相液相色譜柱上有很多填料，包括聚合物，聚合物表面涂上硅膠和氧化鋁，無機(jī)－有機(jī)混合物，涂層氧化鋯和石墨化碳都存在于這些鍵合硅膠上；
為增加c8反相液相色譜柱的應(yīng)用，常利用各種流動相和添加物作用于反相色譜柱，添加物可以改變或修飾填料的表面，有時(shí)候還有可能會污染鍵合相表面；
硅膠表面的疏水鍵合相是硅烷醇，殘留的硅烷醇存在于所有的硅膠鍵合填料中，這些硅烷醇具有弱酸性，因此能與某些待分析物反應(yīng)成為基質(zhì)成分。
其二，樣品中含有的鹽、脂質(zhì)、含脂物質(zhì)、腐質(zhì)酸、疏水蛋白質(zhì)和其它一些物質(zhì)是一些可能在使用時(shí)與HPLC柱發(fā)生相互作用的物質(zhì)。部分非常疏水的樣品基質(zhì)，如：玉米油，高芳香物質(zhì)和蠟?zāi)苷匙」潭ㄏ嘌b填表面并且改變其性質(zhì)；
含有蛋白質(zhì)物質(zhì)的生物流體也能吸附在填料表面。有些物質(zhì)有比待測物或少或大的保留值，那些保留值較小的物質(zhì)如鹽類一般來說在空體積時(shí)就被沖出色譜柱，這些非目標(biāo)產(chǎn)物的干擾能被檢測器檢測到而且能形成色譜峰，氣泡，基線上移或者是負(fù)峰。如果樣品成分在柱子中有很強(qiáng)的保留而且流動相溶液成分不足以把這些物質(zhì)洗脫下來，多次上樣后，這些吸附在柱子表面的物質(zhì)通常就會積累在柱頭。這些行為通常只有通過平行實(shí)驗(yàn)才能發(fā)現(xiàn)。有著中等保留值的樣品能被緩慢洗出而且表現(xiàn)為寬峰，基線擾動，或者基線漂移。
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